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CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂,因其操作简单快速、高灵敏度且细胞毒性低等成为替代MTT法检测细胞生长密度的 方法。该试剂盒利用水溶性四唑盐-WST?-8在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
优势
灵敏度高,数据重复性好
操作简单,安全性高
细胞毒性低,无需放射性同位素
单一组分,无需配制
应用
细胞增殖测定、细胞毒性测定、药物筛选、药敏试验
储存
-20℃避光可保存2年,融化后 4℃避光放置可保存 1 年。反复冻融会增加背景值。
注意事项
1. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基或PBS,而不作为指标检测孔。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
4. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间或增加细胞数量 (~105个细胞/孔)。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于悬浮细胞,在培养1- 4小时后,可先从培养箱中取出,目察染色程度或用酶标仪测定决定。若染色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再确定。 染色的 时间可定为悬浮细胞的 培养时间。对于贴壁细胞,培养时间一般为1-4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察染色程度 (根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。
5. 若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或 pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加CCK-8试剂。
CCK-8细胞增殖和凋亡检测试剂相关一抗
病毒聚蛋白VP1抗体 Hepatitis A virus polyprotein VP1
髓过氧化物酶抗体 MPO/Myeloperoxidase
胶质细胞源性神经营养因子抗体 GDNF
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体 Caspase-6 subunit p11
SYCE1蛋白抗体 SYCE1
丝裂原活化蛋白激酶p38α抗体 P38 MAPK/ MAPK14
白细胞介素4受体抗体 IL-4R
白细胞介素4受体抗体 IL-4R
腺苷A2A受体抗体 Adenosine Receptor A2a
DNA甲基转移酶1抗体 Dnmt1
生成素受体2抗体 TIE2
白细胞介素6受体α/IL-6Rα抗体 IL-6R α
白细胞介素6受体α/IL-6Rα抗体 IL-6R α
β-连环蛋白/β-连环素/β链接素抗体 β catenin
G蛋白偶联受体TAS1R3抗体 TAS1R3
B淋巴细胞11B抗体 Ctip2
c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗体 MERTK
特异性钾离子通道蛋白抗体 ERG/KCNH2
小鼠抗蛋白激酶样内质网激酶单克隆抗体 EIF2AK3/PERK
核纤层蛋白B抗体(细胞核膜标志物) Lamin B
细胞凋亡诱导蛋白NALP3抗体 NALP3/CIAS1
细胞凋亡诱导蛋白NALP3抗体 NALP3/CIAS1
胆固醇25羟化酶抗体 CH25H
小鼠抗MB21D1蛋白单克隆抗体 MB21D1/ C6orf150
重组兔抗Smad4单克隆抗体 Smad4
基质金属蛋白酶-12抗体 MMP12
重组兔抗磷酸化核因子2相关因子2(Ser40)单克隆抗体 phospho-Nrf2 (Ser40)
蛋白激酶C α抗体 PKC α
SBNO2蛋白抗体 SBNO2
白细胞介素1受体相关蛋白抗体 ST2
诱捕受体3抗体 DcR3
硫酸软骨素蛋白多糖4抗体 NG2
刺激分子B7-1蛋白抗体 CD80
白细胞介素28A抗体 IL28A
双微体2癌基因抗体 MDM2
细胞色素CYP2D1抗体 Cytochrome P450 2D1
胞质紧密粘连蛋白1/闭锁小带蛋白1抗体 ZO-1
TBC结构域TBCD4蛋白抗体 TBC1D4
小鼠抗O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶单克隆抗体 MGMT
小鼠抗盘状结构域受体蛋白2单克隆抗体 DDR2/CD167b
周期素依赖激酶抑制剂/P27抗体 CDKN1B
恩夫韦肽抗体 Enfuvirtide
辣椒素受体抗体 TRPV1
辣椒素受体抗体 TRPV1
胰岛素基因增强结合蛋白1抗体 Islet-1