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本试剂采用稳定高效的RT-PCR预混体系，是以RNA为模板进行一步法RT-PCR的专用试剂。其原理为用基因特异性引物进行反转录反应，获得 链cDNA（不可使用Oligo（dT）或Random Rimer合成 链cDNA），再使用基因特异性正向引物和反向引物进行PCR扩增，在同一反应体系中一步完成从反转录到PCR的全部过程。反应体系中已含有电泳所需的指试剂（蓝色和黄色），反应后可以直接进行电泳。
在本试剂中，将耐热M-MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、Hotstart高保真DNA聚合酶以及稳定剂等配制成50×One-Step Enzyme Mix预混液；反应Buffer、dNTP以及电泳指示染料配制成5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer，因此使得操作更加简单便，扩增产物可用于平端克隆和DNA测序。
组分
组分名称 250T
50×One-Step Enzyme Mix 100 μl
5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer 1 ml
RNase Free H2O 1 ml×3
注意：1.50×One-Step Enzyme Mix粘度高， 次使用之前要离心收集至反应管底部，吸取时应缓慢小心。
2.由于使用了Hotstart高保真DNA聚合酶，反应配制可在常温进行，但各组分应-20°C保存。
主要特征
耐热M-MLV反转录酶可在55℃反应能更好的打开复杂二级结构，只需10min即可完成逆转录。
DNA聚合酶为热启动型高保真酶，能够有效的抑制非特异性反应且具有较高的校正活性，酶激活仅需2min。
具有宽泛的模板量兼容性，10 ng~1μg都可有效扩增。
反应过程中无需开盖，避免了操作过程中的污染危害。
储存
请置于-20°C，可保存2年；避免反复冻融。