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描述：RAPA3G DNA 聚合酶为经电子重构架的第三代 Taq
DNA 聚合酶，第三代 DNA 聚合酶具有高度的杂质耐受性、
长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量，这些特点使得
RAPA3G 系列产品可用于粗制样品的直接扩增，无需核酸纯
化步骤。该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切
酶活性、3’-5’的外切酶活性，产物部分带有”A“尾巴，部
分为平末端，因此产物可用于 TA 克隆或平端克隆。该制品
中已经含有溴酚蓝染料，PCR 扩增完毕后可直接点样于琼脂
糖凝胶，无需再加入 DNA Loading Buffer。
特点和用途：
（1）高杂质耐受性：该酶可耐受植物中的多糖多酚；全血、
血清、血浆中的肝素、高浓度的血红蛋白、甘油三脂、乙醇、
胍盐、SDS 等强 PCR 抑制剂。
（2）长片段扩增能力：使用该酶可轻松扩增 8kb 的基因组
片段，20kb 的λ DNA，8kb 的 cDNA。
（3） 快速 PCR：该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度，可
显著的缩短 PCR 的扩增时间，在常规测试条件下，10s 的
延伸时间可完成 1kb 的基因组 DNA 扩增。
（4）高 PCR 成功率：与其它类型的 PCR 扩增试剂对比中，
RAPA3G PCR Mix 表现出 的 PCR 扩增成功率。
（5） 高保真性能：该制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保
真 DNA 聚合酶，因此其具有一定的保真性能（经蓝白斑测
试，其保真性能约为 Taq DNA 聚合酶的 56 倍）。
（6）热启动，防止非特异性扩增：RAPA3G 系列产品均采
用 HaiGene 专有的热启动技术，确保 50 度以下完全无活性，
仅有 95 度加热 5min 以后才能恢复其活性，因此可 限度
的提高扩增的特异性，减少非特异性产物的产生。
RAPA3G DNA 聚合酶对抑制物耐受性
SDS 0.01% 胍盐 0.25%
乙醇 5% 全血 15%
肝素 0.1IU/ml 血清 15%
Trizol 0.5% 血浆 2%
血红素 30μM 尿液 5%
包装：
A0607A 1ml
A0607B 1 ml ×10
储存：长期储存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置
于 4°C（3 个月）保存。

使用方法
1. 按下表配制反应体系并混合均匀：
2×RAPA3G PCR Mix 25 μl
上游引物(10 μM) 2 μl
下游引物(10 μM) 2 μl
模板 DNA 或组织材料 X
ddH2O up to 50 μl
注意：当扩增片段>5kb 时，引物用量调整为 0.25-0.5μl。
50ul 体积建议添加的样品量
抗凝全血 2.5ul 培养细胞 >100 个
血清 2.5ul 组织 0.1mg
尿液 2.5ul 毛发囊 1-3 个
血浆 1ul gDNA 1-400ng
植物叶片 2mm cDNA 1-400ng
植物粗提物 2-4ul 质粒 0.1-10ng
2. PCR 扩增循环参数
循环数 温度 时间
预变性 95°C 5min
25-40 Cycles
95°C 20s
50~60°C 20s
72°C 4-6kb/min
末延伸 72°C 2min
请注意：（1）该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩
短，否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。（2）当扩增片段<1kb
时，延伸时间使用 15s；扩增片段 1-2kb 时,延伸时间使用
45s，扩增片段 2-3kb 时,延伸时间使用 1min，当扩增片
段>3kb 时，请按照 2kb/min 的延伸时间进行设置。(3)尽管
该酶具有 6kb/min 的延伸速度，但按照 2kb/min 设置延伸时
间的条件下，能获得 的产量。
3. 电泳：1% 琼脂糖凝胶电泳，上样 5 μl，电泳结束在紫外
灯下检测条带。
4. 注意事项：(1) 当模板 GC 含量>70%时，请添加
5× Q-Solution（Cat. No.: A3002）。(2)当采用全血、血浆等
蛋白含量极高的样本时，扩增完毕后可能会有变性的蛋白沉
淀，请离心后再进行点样和电泳。