产品名称:Bst 4.0 Basic Mix (液体预混)
含了标准反应缓冲液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA
聚合酶等,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒
温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板
的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于 DNA 的聚合酶活
性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行高
效的恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及 RT-LAMP 扩增反
应的 试剂。优化的反应体系,确保快速的完成检测试
剂的反应体系建立。
本试剂专为 OG 橙绿可视化变色反应设计。但也可
用于自行搭配其它荧光染料,如 SYBR Green I,Eva
Green,SYTO-9 等。注意本试剂不支持 HNB 显色法、
浊度、pH 变色法。其它检测方式未予测试。此外,本试
剂中不含有甘油,可用于建立冻干体系。
货 号 名 称 规格
A3824-02 2.5xBst4.0 Basic MasterMix 1 ml
储存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于
2-8℃,保存 1 个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有
白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响
使用。
使用方法:(进行 LAMP 橙绿变色扩增):
1. 关于 OG 橙绿变色管(货号:A3828-21)说明:橙绿变
色染料(OG Dye)以烘干的形式预加在八联管盖上。
LAMP反应完毕后,将 0.2 ml EP管颠倒溶解OG染料后。
LAMP 的反应产物将与 OG 染料形成绿色肉眼可见变色
反应(阳性),而未扩增的 EP 管为深橙色(阴性)。本试
剂管常温长期保存,同时可搭配 Lyo Bst 4.0 Basic
IsoAmp Bead 冻干球组装成稳定的检测试剂。
2. 配制变色 LAMP 反应体系
在 OG 染料管(0.2ml EP)反应管中加入下述试剂
2.5xBst4.0 Basic MasterMix 10 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、
LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
注意:全部试剂加入完毕后,轻弹 EP 管底部后,再盖上 OG 橙
绿变色管(盖上管盖后务必不能再剧烈混合与倒置,以防止将管盖
上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反应液中将会终止 LAMP
反应)。
3. 反应体系配好后,置于 65°C 进行反应 15~30min。(扩
增良好的引物组合,通常 20min 即可变色,一般不超过
30min)。
4. 观察结果:反应结束后,从加热装置中将反应管取出,
室温 2min,使整个反应管冷却下来。再次用力将反应管
盖压紧,以防止液体泄露。将反应 EP 管倒置,并手腕轻
甩,反应液浸泡 EP 管盖上的 OG 染料,静置 1min(中
间可轻弹 1-2 次,以加速溶解 OG 染料)。再将 EP 反应
管正置,并轻甩反应液到 EP 管底部,此时扩增样品将变
为鲜艳肉眼可见绿色,而阴性未发生扩增的管将为深橙
色。
注意:(1)观察结果时,尽可能不要与配制反应空间共用,
以防止污染操作台。(2)尽管 HaiGene 选取的为高密封
性的 EP 管,但也时有 EP 管发生液体泄露。在反应管倒
置时,可用纸巾包裹 EP 管,一旦发生泄露,丢弃纸巾,
防止台面污染。(3)整个操作过程,佩戴手套、口罩等个
人防护用品。
注意事项:
(1)OG 染料管,支持的总反应体积为 20-25 μl,更大
的体积可能导致颜色浓度下降。
(2)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,
可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污
染。矿物油并不影响 OG 染料的溶解。
(3)在使用其它荧光染料时,使用浓度可自行优化,通
常来讲,参考供应商提供浓度的 0.25-0.8x,过高浓度的
染料可能导致扩增失败。
(4)本试剂不支持浊度、pH 变色、HNB 变色反应,请
勿尝试。
(5)该试剂中不含有甘油组分,具有冻干经验的人员可
进行冻干试剂的开发。
A3801 Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
A3901 Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)
A3901L Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油
A3805 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)
A3805L Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油
A3805-00 HotStart Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(16U/ul)无甘油
A3831-00 HotStart Bst4.2 DNA/RNA聚合酶(16U/ul)无甘油
A3831-00 HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)
A3824-01 Bst 4.0 LowSalt Mix
A3828-01 Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)
A3824-01R Bst 4.0 LowSalt Red LyoMix
A3828-01R Bst 4.0 LowSalt Red Bead
A3824-02 Bst 4.0 Basic Mix (液体预混)
A3828-02 Bst 4.0 Basic Bead
A3824-03 Bst 4.0 SYBR Green Mix
A3828-03 Bst 4.0 SYBR Green Bead
A3828-04 Bst 4.0 HNB Bead
A3824-05 Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)
A3831-01 HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可冻干)
A3831-02 HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可冻干)
A3831-03 HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基础冻干球)
A3831-04 HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球)
A3831-05 HotStart Bst 4.2 Red Bead(红黄变色冻干球)
A3831-06 HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫绿变色冻干球)
A3831-20 Oligo Lyophilized Solution (引物冻干剂)
A3824-02 Bst 4.0 Basic Mix (液体预混)
A3828-21 OG 橙绿变色管
LP1002 COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set
LP2002 COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set (探针法)
A2250 RAPA3G SYBR Green qPCR Mi