产品名称：猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)

本产品是以染料法荧光定量PCR技术为基础开发的PCR试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物等组分经过优化，灵敏度高。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他的DNA/RNA发生交叉反应。
5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6.本产品足够50次20μL体系的染料法荧光定量PCR反应。

猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)操作方法
1.标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2.用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液， 用带芯枪头，下同）。
3.在7号管中加入5 μL 阳性对照（其浓度为1×10E8拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
1.用自选方法纯化样品的DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
2.如果有N个样品，则需要进行N+2个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
如果进行定量分析，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于标准曲线样品。如果做定性分析，则6个标准曲线样品只选一个做（可以选4号，其余样品不变）。以下只介绍定量分析的反应设置。

【操作步骤】详情见使用说明书。

1.样品处理（样本处理区）
1.1样本前处理
1.2DNA提取
2.试剂配制（试剂准备区）
3.加样（样本处理区）
4.PCR扩增（核酸扩增区）
5.结果分析判定

猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)注意事项

1所有操作严格按照说明书进行；

2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3反应液应避光保存；
4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)数据处理：

1 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
2 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于40则为阴性，如果小于40，则为阳性。

保存条件：-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于7次

有效期：12个月

猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)多产品如下：

Egg Drop Syndrome Virus-1976(EDSV-76)鸡减蛋综合征病毒-1976染料法荧光定量PCR试剂盒 1472400 50次 2990
Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)鸡病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 1472300 50次 2990
Influenza Virus C丙型病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1472100 50次 3490
Trichuris suis猪鞭虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1472020 50次 2990
Trichuris ovis绵羊鞭虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1472010 50次 2990
Trichuris spp.鞭虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1472000 50次 2990
Madurella mycetomatis足马杜拉分枝菌染料法荧光定量PCR试剂盒 1471920 50次 2990
Madurella grisea灰马杜拉分枝菌染料法荧光定量PCR试剂盒 1471910 50次 2990
Madurella spp.马杜拉分枝菌染料法荧光定量PCR试剂盒 1471900 50次 2990
Yellow-Head Baculovirus(YBV)黄头杆状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1471800 50次 3490
Isospora suis猪等孢球虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1471710 50次 2990
Isospora spp.等孢球虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1471700 50次 2990
Cyclospora cayetanensis 环孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1471400 50次 2990
Fusobacterium necrophorum坏死梭杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 1471300 50次 2990
Haemonchus similis似血矛线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1471200 50次 2990
Simian Type-D Retrovirus(SRV)猴D型逆转录病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1471100 50次 3490
Hendra Virus亨德拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1470900 50次 3490
Nuclear Polyhedrosis Virus(NPV)核型多角体病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 1470800 50次 2990
Chinese Mitten Crabs Trembling Disease Virus河蟹病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1470700 50次 3490
Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus(PHEV)猪血凝性脑脊髓炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1470600 50次 3490
Amidostomum anseri鹅裂口线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1470400 50次 2990
Besnoitia besnoiti贝氏贝诺孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1470200 50次 2990
Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)火鸡出血性毒染料法荧光定量PCR试剂盒 1470100 50次 2990
Piscirickettsia salmonis鲑鱼立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 1470000 50次 2990
Infectious Salmon Anaemia Virus(ISAV)鲑鱼病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1469900 50次 3490
Renibacterium salmoninarum鲑肾杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 1469800 50次 2990
Syngamus trachea气管比翼线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1469700 50次 2990
Guaratuba Virus瓜纳图巴病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1469600 50次 3490
Guanarito Virus(GTOV)瓜纳瑞托病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1469500 50次 3490
Columbid Herpes Virus 1(CHV-1)鸽病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒 1469400 50次 2990
Equine Rotavirus马轮状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1469200 50次 3490
White Sturgeon Iridovirus(WSIV)高首鲟虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 1469100 50次 2990
Hepatopancreatic Parvovirus(HPV)肝胰腺细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 1468700 50次 2990
Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium（NHPB）肝胰腺坏死性细菌(虾肝胰腺坏死性细菌)染料法荧光定量PCR试剂盒 1468600 50次 2990
Fasciola spp.肝片吸虫病染料法荧光定量PCR试剂盒 1468500 50次 2990
Chabertia ovina绵羊夏伯特线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1468400 50次 2990
Flexal Virus(FLEV)弗莱克索病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 1468300 50次 3490
Tarsonemus spp.跗线螨属染料法荧光定量PCR试剂盒 1468200 50次 2990
Aethina tumida蜂房小甲虫染料法荧光定量PCR试剂盒 1468100 50次 2990