产品名称：Tilleiia walkeri Castl. 黑麦草腥黑粉菌PCR试剂盒

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本产品就是根据PCR原理专门开发的试剂盒，它具有下列特点：

1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。

2.引物等组分经过优化，灵敏度高。

3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4.特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他的DNA/RNA发生交叉反应。

5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。

6.本产品足够50次20μL体系的染料法荧光定量PCR反应。

包装规格及成分（具体信息详见说明书）：

Tilleiia walkeri Castl. 黑麦草腥黑粉菌PCR试剂盒的制备 

电泳分析 
1. 取 5-10uL 扩增产物进行常规琼脂糖电泳，检测扩增效果，由于扩增产物较短，建议用 1.5%-2.0%的琼脂糖凝胶。
2. 阳性样品预期得到的扩增产物长度为 200bp 左右。如果两个阴性对照（样品制备阴性对照或 PCR 阴性对照）有此扩增产物，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析实验结果。
3. 如果所有样品和 PCR 阳性对照均无此扩增产物，则说明有系统性的问题（试剂、设备、程序、操作等），需要重复并排查原因。
4. 如果没有上述两种情况，则实验有效，可以分析样品的扩增结果。N+2 个样品中有扩增产物的判定为阳性，无则判定为阴性。

Tilleiia walkeri Castl. 黑麦草腥黑粉菌PCR试剂盒储存

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。阳性对照需单独放置，不要污染其他试剂。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

4、自备试剂：样品DNA。

Tilleiia walkeri Castl. 黑麦草腥黑粉菌PCR试剂盒注意事项：

1 所有操作严格按照说明书进行；

2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，混匀并短暂离心；

3 反应液应避光保存；

4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

数剧处理：

1. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值
为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 RNA
浓度的 log 值，再推算出其浓度。
2. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照必须没有 Ct
值，或者 Ct 值必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型
扩增曲线，Ct 值应该小于 40。对待测样品，如果没有 Ct 值，或者 Ct 大于
或等于 40 则为阴性，如果小于 40 则为阳性。

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