产品名称:单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法)
实验原理
单胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)是一组催化多种单胺类化合物氧化脱氨的酶,属于细胞外酶,含有铜离子,分布于肝脏等组织的线粒体内,其含量分布为肝脏>脑>肺>骨骼肌。血小板、胎盘中也含有MAO,线粒体中MAO与膜紧密结合,仅少量为可溶性的,存在于细胞质中,血液和结缔组织中MAO为水溶性。
上海雅吉单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法)其检测原理是待测样品在MAO作用下,氧化底物苄胺生成苄醛,后者经催化反应生成醛苯腙,呈棕红色,通过分光光度计检测470nm处吸光度,根据标准曲线即可测出MAO活力。50T试剂盒可检测约20个样本。该产品仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法)操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法)产品包装图:
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