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细胞培养基的选择与培养

2024-11-11
细胞培养基的选择与培养
培养基 是培养环境中最重要的组成部分,因为它为细胞生长提供了必要的营养、生长因子和激素,并调节培养物的pH值和渗透压。尽管最初的细胞培养实验使用从组织提取物和体液中获得的天然培养基进行,但对标准化和培养基质量的需求不断增长,促进了化学成分确定的培养基的发展。
培养基的种类

培养基的三个基本类别分别是基础培养基、减血清培养基和无血清培养基,三种培养基对血清添加的要求有所不同。

基础培养基
大多数细胞系在含有氨基酸、维生素、无机盐和碳源(例如葡萄糖)的基础培养基中生长良好,但在这些基础培养基的配方中必须进一步添加血清。

减血清培养基
减血清培养基是在细胞培养实验中,减少血清不良影响的另一种策略是使用减血清培养基。减血清培养基是富含营养物质和动物源性因子的基础培养基配方,可减少所需的血清量。

无血清培养基
无血清培养基(SFM)通过用适当的营养和激素配方替代血清,避免了使用动物血清的问题。无血清培养基配方适用于许多原代培养物和细胞系,包括用于生产重组蛋白的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系、各种杂交瘤细胞系、昆虫细胞系Sf9和Sf21(草地贪夜蛾)以及用作病毒生产宿主的细胞系(例如293、VERO、MDCK、MDBK等)。使用无血清培养基的主要优势之一是,能够通过选择生长因子的适当组合使培养基对特定细胞类型具有选择性。

细胞培养基最佳实践方案

下面是细胞培养基实践方案的一些简单的提示和技巧,可以帮助您确保细胞培养基保持最佳性能。我们提供各种经典的基础培养基、减血清培养基和无血清培养基,以及生长因子、添加剂、抗生素和试剂,供您进行细胞培养实验。

1.如果细胞培养基忋冷藏(2-8 ℃),请在使用前加热。
2.细胞培养基保持避光储存。暴露于光线会使培养基中细胞生长所需的必需维生素降解。
3.一旦您向细胞培养基添加FBS后,请将完全培养基放入冰箱(2-8 ℃)以保持性能。
4.在2-4周内用含添加剂的培养基,以减少污染几率。